Tromboza AV šanta u NHP-ovima: tumačenje krajnjih točaka protoka, tromba i krvarenja
Količina ugruška otkrivena na kraju studije tromboze arteriovenskog (AV) šanta jedan je od nekoliko očitanja. u amodel AV šanta neljudskih primata (NHP)., krv teče kroz definirani ekstrakorporalni ispitni segment pod protokom. Postavka podržava procjenu ponašanja protoka i stvaranja tromba na površini koja dolazi u dodir s krvlju, a komplementarne krajnje točke hemostaze opisuju sigurnosnu stranu antitrombotičkog odgovora.
Ova mjerenja odgovaraju na različita pitanja. Protok pokazuje utječe li tromb u razvoju na prohodnost. Opterećenje trombom opisuje materijal nataložen na ili unutar testnog segmenta.Krvarenje i hemostazamjere pokazuju dolazi li inhibicija tromboze s pretjeranim učinkom na normalnu hemostazu. Nijedna krajnja točka ne pokriva sve tri dimenzije farmakologije.
Što mjeri model AV šanta
Modeli tromboze AV šantapostavite testni uređaj ili segment presatka u krug koji ga izlaže protoku krvi. Kontakt sa stranom površinom, lokalna geometrija i rezultirajuće polje protoka pokreću adheziju i aktivaciju trombocita, koagulaciju i stvaranje fibrina. Ravnoteža između ovih procesa ovisi o ispitnom artiklu, površinskom materijalu, geometriji uređaja i hemodinamskim uvjetima, kao i o osnovnom hematološkom stanju životinje.
Povijesni rad utvrdio je izvedivost mjerenja stvaranja tromba u rezus majmuna pomoću testnih uređaja izloženih krvi u arterioarterijalnim ili arteriovenskim shuntovima. U jednoj studiji, tromb nataložen tijekom definirane izloženosti kvantificiran je gravimetrijski; geometrija uređaja i materijal utjecali su na prikupljenu količinu, a istraživači su izvijestili o predvidljivijem protoku u AV nego u arterioarterijalnoj konfiguraciji.[1] Srodna studija koristila je model za usporedbuantitromboticii kombinirano gravimetrijsko mjerenje tromba s ultrastrukturnom procjenom.[2] Ove studije pružaju dokaz načela, a ne gotov protokol ili univerzalni referentni raspon za suvremenu NHP studiju.
Tretirajte model kao kontrolirani, akutni trombogeni izazov izgrađen oko protoka krvi i definirane površine koja dolazi u dodir s krvlju. Ne reproducira sve značajke spontane arterijske ili venske tromboze u bolesnika. Krajnja točka ugruška povezana s uređajem ne bi se trebala tumačiti kao izravna zamjena za rupturu plaka, vensku tromboemboliju, moždani udar, infarkt miokarda ili kliničko otkazivanje presatka.
Tri domene krajnjih točaka i zašto bi trebale ostati različite
1. Prohodnost protoka i šanta
Protok je funkcionalno očitanje evoluirajuće interakcije između tromba i ispitnog kruga. Ovisno o dizajnu studije, korisni sažeci uključuju osnovni i serijski profil protoka, promjenu od osnovnog, protok tijekom vremena ili vrijeme do unaprijed određenog smanjenja ili prekida protoka. Ako se protok kontinuirano prati, podaci pokazuju kada promjena počinje i je li održiva, informacije koje samo terminalno mjerenje ne može pružiti.
Protok se mora tumačiti u odnosu na mjerni sustav. Položaj sonde, otpor kruga, dimenzije uređaja, tlačni uvjeti, temperatura i tehnički prekidi utječu na snimljeni signal. Protokol bi trebao definirati prihvatljivi osnovni raspon, kako se postupa s artefaktima signala i što predstavlja interpretabilno smanjenje protoka prije nego što se usporede skupine za liječenje. "Vrijeme do okluzije" ima smisla samo kada su prag i prozor promatranja unaprijed određeni i model pouzdano doseže taj događaj pod odabranim uvjetima.
Niža masa tromba ne dokazuje da je protok bio očuvan, a očuvan protok ne dokazuje da je nastao mali tromb. Neokluzivna naslaga se nakuplja bez nagle promjene protoka; strateški smješteno ležište otežava protok unatoč skromnoj ukupnoj masi. Protok i opterećenje trombom komplementarne su krajnje točke i nijedna ne zamjenjuje drugu.
2. Opterećenje i sastav tromba
Procjena terminalnog tromba kvantificira materijal formiran na ili unutar testnog segmenta. Gravimetrijsko mjerenje izravan je, utvrđen pristup u povijesnoj literaturi o primatima, ali rezultat ovisi o standardiziranom izvlačenju, rukovanju i vaganju. Protokol bi trebao specificirati je li izmjerena krajnja točka mokra ili obrađena masa, kako se rješava zaostala krv i jesu li rezultati normalizirani na relevantnu karakteristiku uređaja kao što je izloženo područje ili trajanje izloženosti. Ovi izbori moraju biti dosljedni među skupinama i prijavljeni na isti način.
Sama masa ne otkriva što tromb sadrži niti kako je nastao. Tamo gdje je to znanstveno opravdano, snimanje ili mikroskopija i ciljana procjena komponenti trombocita i fibrina dodaju mehanički kontekst. Takve analize pomažu razlikovati promjenu ukupnog taloženja od promjene u relativnom doprinosu materijala bogatog trombocitima i fibrinom. Unaprijed definirajte metodu, mjesto uzorkovanja i pristup bodovanju i tretirajte eksplorativno morfološko očitanje kao eksplorativno dok se ne kvalificira.
Korisni skup krajnjih točaka povezuje promatranje u krugu s izvađenim uzorkom: putanja protoka tijekom izlaganja, količina tromba na krajnjoj točki i, gdje je uključeno, karakterizacija sastava tromba. Taj slijed daje potpunije očitanje od pojedinačne težine terminala.
3. Krvarenje i hemostaza
Antitrombotičko djelovanje i njegovoučinci na hemostazupripadaju istoj analizi. Studija obično spaja klinička opažanja krvarenja, procjenu pristupnih ili proceduralnih mjesta, protokolom definiranu mjeru krvarenja i laboratorijske ili farmakodinamičke podatke relevantne za mehanizam djelovanja lijeka. Precizna ploča slijedi testni članak i studijsko pitanje, a ne predložak kopiran iz druge vrste ili farmakološke klase.
Vrijeme krvarenja, kada se koristi, je mjera ovisna o kontekstu na koju utječu metoda i izvođenje; to nije izravna procjena kliničkog rizika od krvarenja. Isto tako, rutinski testovi koagulacije, broja trombocita ili testovi funkcije trombocita obuhvaćaju samo dio hemostaze i nisu jednako osjetljivi na svaki mehanizam. Tumačenje je jače kada se opažanja upare s podacima o izloženosti i farmakodinamici, kao što je relevantna analiza koagulacije ili trombocitnog puta, umjesto da se bilo koji pojedinačni laboratorijski rezultat tretira kao potpuni zaključak o sigurnosti.
Krajnje točke krvarenja također zahtijevaju standardizirani pristup idobrobit životinjapregled u NHP-ima. Protokol bi trebao navesti kako se događaji promatraju i ocjenjuju, relevantno razdoblje promatranja, kriterije za praćenje ili intervenciju i kako se krvarenje u postupku razlikuje od signala povezanog s lijekom. Nalaz smanjene tromboze bez otkrivenog krvarenja u maloj studiji ne podupire tvrdnju o "bez rizika od krvarenja".
Izgradite paket krajnje točke oko farmakološkog pitanja
Odabir krajnje točke slijedi planiranu odluku. Antitrombocitni program obično zahtijeva taloženje trombocita ili funkciju, protok i procjenu hemostaze. Antikoagulantni program uključuje farmakodinamiku i izloženost putu zgrušavanja, što čini promjenu u stvaranju tromba interpretabilnom. Uređaj za modificiranje površine stavlja naglasak na taloženje specifično za materijal i karakterizaciju površine. U svakom slučaju krajnje točke povezuju se s mehanizmom djelovanja i granicama modela.
Koherentna studija AV šanta obično usklađuje četiri toka informacija:
- Funkcionalni odgovor:ponašanje protoka i sve unaprijed određene mjere prohodnosti ili okluzije.
- Odgovor tromba:deponirani iznos, s procjenom sastava ili morfologije kada je to opravdano.
- Farmakologija:izloženost ispitnom članku i farmakodinamička mjerenja relevantna za mehanizam u interpretabilnim vremenskim točkama.
- Hemostatski kontekst:klinička opažanja krvarenja i odabrane laboratorijske ili funkcionalne mjere prikladne kandidatu.
Plan analize trebao bi identificirati primarnu krajnju točku i razlikovati je od potpornih ili istraživačkih mjera. Randomizacija, slijepa procjena gdje je to moguće, kontrolni uvjeti,opravdanje veličine uzorkai unaprijed definirano postupanje s tehničkim kvarovima smanjuju nesigurnost tumačenja. Ako se razmatra ponovljena izloženost ili usporedbe unutar životinje, dizajn mora uzeti u obzir prijenos, ispiranje i biološku varijabilnost odabranih krajnjih točaka.
Izvori varijabilnosti koji mijenjaju rezultat
Rezultat tromboze AV šanta specifičan je za eksperimentalnu konfiguraciju. Materijal i geometrija uređaja, izložena površina, dimenzije kruga, uvjeti protoka, trajanje izlaganja i periproceduralno upravljanje utječu na stvaranje tromba. Biološki čimbenici, uključujući broj i funkciju trombocita, hematokrit, status koagulacije, vrstu, individualnu varijabilnost i popratne lijekove, također utječu na odgovor.
Ovi čimbenici nisu samo tehnički detalji. Ako se razlikuju među skupinama ili razdobljima istraživanja, mijenjaju prividni učinak liječenja. Osnovna hematologija, dosljedna priprema i rukovanje uređajem, kalibrirano mjerenje protoka, proceduralna standardizacija i potpuna dokumentacija dio su valjanosti krajnje točke. Protokol također treba definirati kako će se neočekivani prekid protoka, kvar uređaja ili neadekvatno stvaranje tromba bilježiti i tretirati u analizi.
NHP kontekst dodaje vrijednost kada studija zahtijeva integriranu in vivo procjenu izloženosti, farmakologije i hemostatskog odgovora kod primata. To ne eliminira potrebu za kvalifikacijom modela. Povijesne rezus studije pokazuju da AV shuntovi podržavaju studije stvaranja tromba i antitrombotičkih učinaka, ali ne utvrđuju da se rezultati prenose nepromijenjeni na drugu vrstu, konfiguraciju uređaja, klasu spojeva ili suvremenu postavku studije.[1,2]
Prijevod: profil koristi i rizika
Zaključak da kandidat "smanjuje trombozu" malo govori sam za sebe. Pitanja su je li se smanjenje pokazalo u protoku, u opterećenju trombom ili oboje; je li pratio izloženost lijeku i očekivani farmakodinamski mehanizam; i što podaci o hemostazi pokazuju u istom rasponu izloženosti. Nesklad među krajnjim točkama je informativan i obično odražava razlike u osjetljivosti, vremenu, mjestu ili mehanizmu ugruška, a ne neuspjeli eksperiment.
Model tromboze NHP AV šanta pridonosi pretkliničkoj procjeni antitrombotičke farmakologije kada se njegova konfiguracija i krajnje točke usklade s odlukom koja je pri ruci. Njegova snaga leži u dovođenju protoka, tromba povezanog s uređajem i sistemske farmakologije u jedan eksperimentalni kontekst. Njegova su ograničenja jednako važna: to je akutni model ovisan o konfiguraciji i ne može sam utvrditi kliničku učinkovitost, klinički rizik od krvarenja ili terapijsku korist u specifičnoj populaciji pacijenata.
Za prevoditeljske timove, praktični prioritet je prvo definirati pitanje, zatim odabrati krajnju točku protoka, krajnju točku tromba i paket hemostaze dizajniran da se čitaju zajedno. To usklađivanje, a ne broj mjerenja, određuje hoće li studija proizvesti dokaze relevantne za odluku.
Često postavljana pitanja
P: Što mjeri model tromboze NHP AV šanta?
O: Procjenjuje stvaranje tromba na ili unutar definiranog testnog segmenta u kontaktu s krvlju pod protokom u NHP. Ovisno o protokolu, krajnje točke uključuju ponašanje protoka, povrat tromba, sastav tromba, izloženost lijeku, farmakodinamičku aktivnost i hemostatske učinke.
P: Zašto mjeriti protok kao i masu tromba?
O: Protok opisuje funkcionalnu prohodnost tijekom eksperimenta, dok masa tromba kvantificira taloženi materijal na krajnjoj točki prikupljanja. Mjere su povezane, ali nisu međusobno zamjenjive: tromb se ponekad nakuplja bez okluzije, a mali strateški smješteni ugrušak nerazmjerno utječe na protok.
P: Znači li manje opterećenje trombom manji rizik od krvarenja?
O: Ne. Antitrombotička učinkovitost i krvarenje su povezane farmakološke domene koje se moraju mjeriti odvojeno. Studija bi trebala uključivati procjenu hemostaze koja odgovara mehanizmu, a samo smanjenje opterećenja trombom ne dokazuje nepostojanje kliničkog rizika od krvarenja.
P: Mogu li rezultati AV šanta predvidjeti kliničke ishode tromboze?
O: Oni pružaju pretkliničke dokaze o antitrombotičkoj aktivnosti u definiranoj konfiguraciji uređaja i protoka. Oni sami po sebi ne predviđaju kliničke ishode niti reproduciraju sve mehanizme spontane arterijske ili venske tromboze.
Reference
- Mason RG, Wolf RH, Zucker WH, Shinoda BA.Model vaskularnog šanta primata koji nije čovjek za stvaranje tromba.Laboratorijska istraživanja. 1976;34(6):558-564.PubMed PMID: 819713.
- Mason RG, Wolf RH, Zucker WH, Shinoda BA, Mohammad SF.Učinci antitrombotičkih sredstava procijenjeni u modelu vaskularnog šanta neljudskih primata.American Journal of Pathology. 1976.PubMed PMID: 820202; puni tekst.
